油乳劑滅活疫苗粘度測定

一、油乳劑滅活疫苗簡介

疫苗是指接種動物后能產(chǎn)生自動免疫，從而預(yù)防疾病的一類生物制劑，包括細(xì)菌性疫苗、病毒性疫苗等。油乳劑滅活疫苗是以礦物油為佐劑與滅活后的抗原混合乳化制成，即將一種液體或粉末微粒（分散相或內(nèi)相）借助乳化劑、助懸劑及其他助劑、機(jī)械力的作用，分散懸浮于另一種不相溶的液體（連續(xù)相或外相）中，從而形成穩(wěn)定的分散體系。滅活抗原與油乳劑混合制成的油包水型（W/O）乳劑，是獸醫(yī)生物制劑中的一種常用劑型，具有吸收緩慢、免疫刺激持續(xù)和免疫保護(hù)期長等特點(diǎn)，在獸用疫苗方面具有廣泛應(yīng)用前景。

二、粘度測定及流變學(xué)研究的意義

粘度是衡量油乳劑滅活疫苗產(chǎn)品質(zhì)量和使用性能的重要技術(shù)指標(biāo)，與疫苗的免疫效力密切相關(guān)。產(chǎn)品粘度過低，易造成油乳劑不穩(wěn)定；增加產(chǎn)品粘度，雖然可以降低分散相液珠的運(yùn)動速率，有利于油乳劑的穩(wěn)定性，但是高粘度的產(chǎn)品不利于靜脈注射，一方面給獸醫(yī)人員注射疫苗造成很大困難，另一方面使靶動物的應(yīng)激反應(yīng)大且機(jī)體難以吸收，還可能引起動物注射部位發(fā)生炎癥，影響動物的生長發(fā)育。如何在保證疫苗穩(wěn)定性及保存期的前提下，降低疫苗的粘度，盡量減少疫苗在使用過程中的副作用及動物在注射過程中的不良反應(yīng)，成為油乳劑滅活疫苗生產(chǎn)和研制的關(guān)鍵。

油乳劑滅活疫苗的制備工藝可簡單分為：水相的制備，油相的制備，乳化工藝。粘度與其生產(chǎn)及制備過程中硬脂酸鋁（助懸劑，用于提高疫苗穩(wěn)定性）的用量，油相與水相的比例，乳化劑的種類及用量，白油的品質(zhì)，乳化程度與乳化時(shí)間等因素密切相關(guān)。因此，在油乳劑滅活疫苗的生產(chǎn)及研制過程中，應(yīng)綜合考慮上述因素，通過選擇良好的原料和優(yōu)化乳劑配方及生產(chǎn)工藝，制備既有粘性特點(diǎn)，發(fā)揮其抗原緩釋作用，又能延長免疫期限的品質(zhì)優(yōu)良的油乳劑滅活疫苗。

三、油乳劑滅活疫苗粘度測定

本文使用DV3T標(biāo)準(zhǔn)流變儀配套小量樣品適配器（如圖1所示）測量一種油乳劑滅活疫苗的粘度。幫助用戶建立油乳劑滅活疫苗的生產(chǎn)及制備工藝過程中產(chǎn)品質(zhì)量控制的測試方法。

TC-650AP水浴循環(huán)系統(tǒng)用于控制樣品溫度（測試溫度為25℃），Rheocalc T軟件連接主機(jī)，進(jìn)行程序編輯及數(shù)據(jù)采集，繪制粘度變化曲線。

吸取一定量的已配油乳劑滅活疫苗于SSA的樣品杯中，將轉(zhuǎn)子緩慢樣品浸沒至樣品中，然后連接粘度計(jì)主機(jī)和TC-550 AP水浴循環(huán)系統(tǒng)，設(shè)置測試溫度為25℃。在Rheocalc T 軟件上編輯相應(yīng)的測試程序，待樣品溫度穩(wěn)定后開始測量。

選擇“Multi Point"模式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，在2 min的測試時(shí)間內(nèi)總共采集了12個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)，觀察測試過程中數(shù)據(jù)讀取及溫度控制的穩(wěn)定性。根據(jù)圖2可知，使用水浴控溫時(shí)，測試穩(wěn)定性非常好，12個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的粘度平均值為63.43 cP，RSD僅為0.02%。扭矩讀數(shù)平均值為42.3%，可以使用該測試方法進(jìn)行產(chǎn)品的粘度控制。

SSA測試所需樣品體積僅為2-16mL（具體的樣品量與所使用的轉(zhuǎn)子型號相關(guān)），可有效節(jié)約測試成本，提升測試效率；SSA使用同軸圓柱型轉(zhuǎn)子及配套的樣品杯，可以計(jì)算剪切率和剪切應(yīng)力，得到絕對粘度；TC系列循環(huán)水浴系統(tǒng)的控溫精度最高可達(dá)0.01℃，為粘度測試提供準(zhǔn)確及穩(wěn)定的溫度條件。